˲ʱתȾԭÀí¼°ÊµÑé²½Öè

²¸È鶯Îïϸ°û˲ʱתȾÄÜÔÚ¶ÌÆÚÄÚ¿ìËÙ±í´ï¸ß»îÐÔµ°°×¶ø±»¹ã·ºÓ¦Óᣱ¾ÎÄÖ÷Òª½éÉÜÁËϸ°û˲ʱתȾµÄ²½Öè¡¢Ô­Àí£¬¼°ÑªÇò¼ÆÊý°å¶Ôϸ°û¼ÆÊýµÄÔ­ÀíºÍ·½·¨¡£²¸È鶯Îïϸ°û×ÔÉí¾ßÓе°°×ÕÛµþºÍ·­ÒëºóÐÞÊεŦÄÜ£¬»ñµÃµÄµ°°×¸ü¾ßÓÐÌìÈ»»îÐÔ¡£²¸È鶯Îïϸ°ûÉú²úµ°°×µÄ·½Ê½ÓÐÁ½ÖÖ£ºË²Ê±×ªÈ¾ºÍÎȶ¨×ªÈ¾¡£Ë²Ê±×ªÈ¾µÄÌØµãÊÇ¶ÌÆÚ¿ìËÙ±í´ï£¬Âú×ãµ°°×µÄСÁ¿ÖƱ¸¡£¶øÎȶ¨×ªÈ¾Í¨¹ý¹¹½¨Îȶ¨Ï¸°ûϵÄܹ»Âú×ãµ°°×µÄ´óÁ¿¡¢³¤ÆÚÉú²ú¡£

˲ʱתȾÊÇÖ¸½«¹¹½¨ºÃµÄÖÊÁ£Í¨¹ýijÖÖ·½Ê½µ¼Èëµ½²¸È鶯Îïϸ°ûÄÚ£¨Ö÷ÒªÖ¸HEK293ϸ°û£©£¬¸ÃÖÊÁ£ÉϵÄÍâÔ´»ùÒò²»ÕûºÏµ½Ï¸°û×ÔÉíµÄ»ùÒò×éÉÏ¡£Ëæ×Åϸ°ûµÄÉú³¤·ÖÁÑ£¬ÍâÔ´»ùÒò»áÖð½¥¶ªÊ§¡£ÖÊÁ£ÔÚϸ°ûÄÚÄܹ»´æÔÚ3-4Ì죬´Ëʱ¼äÄÚ£¬ÖÊÁ£ÍâÔ´»ùÒòÔÚϸ°ûÄÚ·¢Éúת¼·­Ò룬µÃµ½¼«ÎªÉÙÁ¿µÄµ°°×¡£ÕâÒ»Õû¸ö¿ìËÙתȾµÃµ½µ°°×µÄ¹ý³Ì¾Í³ÆÎªË²Ê±×ªÈ¾±í´ï¡£

˲ʱתȾ²½Öè

˲ʱתȾÁ÷³Ì¼òͼ

˲ʱתȾÁ÷³Ì¼òͼ

ϸ°û¸´ËÕ

ϸ°û¸´ËÕÊǽ«±£´æÔÚÒºµª»ò-80¡æ±ùÏäÖеÄϸ°ûÖê½â¶³²¢ÖØÐÂÅàÑøµÄ¹ý³Ì¡£Ï¸°û¸´ËյĹؼüÊÇ¿ìËÙ¡£·ÀÖ¹Ôڽⶳ¹ý³ÌÖУ¬²úÉúµÄË®ÖéÐγɱù¾§ËðÉËϸ°û¡£Ï¸°û¸´ËÕÒ»°ã²½ÖèÈçÏ£º

  1. Ô¤ÏȼÓÈÈˮԡ¹ø£¬Î¶ÈÖÁ37-40¡æ£¬²¢ÔÚÀëÐĹÜÖÐ×¼±¸ºÃ10mlÅàÑø»ù
  2. ´ÓÒºµª¹Þ»ò±ùÏäÖÐÈ¡³öϸ°û£¬Ñ¸ËٷŽøÔ¤ÈȵÄˮԡ¹øÖУ¬Ä÷×Ó¼Ðס¶³´æ¹Ü»Î¶¯£¬Ê¹ÆäÊÜÈȾùÔÈ
  3. µ±¶³´æ¹ÜÄÚÍêÈ«ÈÚ»¯Ê±£¬×¢ÒâÓþƾ«²ÁÊö³´æ¹ÜÏû¶¾£¬½«ÒºÌåµ¹È뺬ÓÐ10mlÅàÑø»ùµÄÀëÐĹÜÖÐ
  4. ÀëÐÄ5min£¬È¥³ýÉÏÇ壬µÃµ½³Áµí
  5. ÓÃÅàÑø»ùÐü¸¡³Áµí£¬²¢½ÓÖÖµ½ÅàÑøÆ¿³£¹æÏ¸°ûÅàÑø

ϸ°û¸´ËÕºó£¬Éú³¤Ò»¶Îʱ¼ä£¬95%µÄϸ°ûÌù±ÚÉú³¤£¬Ï¸°û״̬Á¼ºÃ£¬ËµÃ÷ϸ°û¸´Ëճɹ¦¡£

˲ת²½Öè

ÒÔLipofectamineתȾÊÔ¼ÁΪÀýµÄ²Ù×÷Á÷³Ì£¬²»Í¬×ªÈ¾ÊÔ¼Á²Î¿¼ËµÃ÷Êé

  1. ½«¸´ËÕºó³£¹æÅàÑøµÄϸ°û°´ÕÕ1-3×105½ÓÖÖµ½6¿×°åÖУ¬¼ÓÈë2-4mlµÄÍêÈ«ÅàÑø»ù£¬»ìÔÈ·ÅÖÃÔÚ¶þÑõ»¯Ì¼ÅàÑøÏäÖÐ37¡æ¹ýÒ¹
  2. ÎÞ¾ú״̬ÏÂÅäÖÃÈçÏÂÈÜÒº£º
    • aÈÜÒº ÓÃ100ulµÄÎÞѪÇåÅàÑø»ùÏ¡ÊÍ2ugµÄ´ýתȾµÄÖÊÁ£
    • bÈÜÒº ÓÃ100ulµÄÎÞѪÇåÅàÑø»ùÏ¡ÊÍ25ulµÄLipofectamineתȾÊÔ¼Á£¨ÑªÇåµÄ´æÔÚ»áÓ°Ïìϸ°ûתȾЧÂÊ£¬Òò´ËҪʹÓÃÎÞѪÇåÅàÑø»ùתȾ£©
  3. ½«abÈÜÒº»ìºÏ²¢Ò¡ÔÈ£¬ÊÒÎÂÏ·ÅÖÃ30min×óÓÒ
  4. ϸ°ûÅàÑøÖÁ80%µ¥²ã×óÓÒ£¬ÓÃÎÞѪÇåÅàÑø»ùÏ´µÓϸ°û2´Î£¬Ã¿¿×¼ÓÈë1mlµÄÎÞѪÇåÅàÑø»ù£¬²¢½«»ìºÏºóµÄabÈÜÒºÖðµÎ¼ÓÈ뵽ÿ¿×£¬°´Ê®×Ö·½ÏòÇáÒ¡»ìÔÈ£¬¶þÑõ»¯Ì¼ÅàÑøÏäÖÐ37¡æÅàÑø24Сʱ
  5. ½«×ªÈ¾Òºµ¹³ö£¬»»ÎªÍêÈ«ÅàÑø»ù¼ÌÐøÅàÑø£¬ÅàÑø3-4Ììºó¼ì²âµ°°×±í´ïÁ¿

תȾ¼ì²â

ÊÕ¼¯ÅàÑøµÄϸ°û£¬²ÉÓó¬Éù»òø½âµÄ·½·¨ÆÆËéϸ°û£¬ÀëÐĵõ½ÉÏÇ塣תȾºóµÄ¼ì²âÖ÷Òª°üÀ¨»ùÒòˮƽºÍµ°°×ˮƽµÄ¼ì²â¡£Õë¶Ô»ùÒòˮƽ£¬Ê¹ÓÃÆÕͨPCR»òRT-PCR½øÐÐÑéÖ¤¡£µ°°×ˮƽ£¬Ê¹ÓÃwestern blot¼ì²â¡£

ϸ°û¼ÆÊý

ϸ°û¼ÆÊýµÄÔ­Àí¾ÍÊDzⶨµ¥Î»Ìå»ýÄÚϸ°ûµÄÊýÁ¿´Ó¶øµÃµ½Ï¸°û×ÜŨ¶È£¬ÔÚϸ°ûÅàÑøºÍ²â¶¨Ï¸°ûÉú³¤ÇúÏߵĹý³ÌÖй㷺ӦÓᣱ¾ÊµÑéÊDzÉÓÃѪÇò¼ÆÊý°å¶Ôϸ°û¼ÆÊý£¬²½ÖèÈçÏ£º

  1. ½«¼ÆÊý°åµÄ¸Ç²£Æ¬Ï´¾»ÁÀ¸É£¬²¢Ïû»¯Ï¸°ûÀëÐļÓÈëÅàÑø»ùÐü¸¡Ï¸°û£¬ÖƵÃϸ°ûÐüÒº
  2. Ï¡ÊÍϸ°ûÐüÒº£¬°´ÕÕÒ»¶¨µÄ±¶Êý
  3. ¸Ç²£Æ¬¸ÇÉϼÆÊý°å±íÃæ£¬ÒÆÒºÆ÷ÎüÈ¡10ul×óÓÒµÄϸ°ûÐüÒº´ÓѪÇò¼ÆÊý°åµÄÒ»·½ÂýÂý×¢Èëµ½¼ÆÊý°åÉÏ
  4. ¸Ç²£Æ¬¾ßÓÐÒýÁ÷µÄ¹¦ÄÜ£¬Òò´ËÖ»ÐèÇáÇá´òÈëµ½°åÉÏ¿×Öм´¿É
  5. ÏÔ΢¾µÏ¹۲ìϸ°û£¬°´ÕÕÒªÇó¼ÆÊý¸ÃѪÇò¼ÆÊý°åÉϵÄϸ°û¸öÊý£¬¼ÆÊý·½Ê½ÈçͼËùʾ

˲ʱתȾѪÇò¼ÆÊý°å

˲ʱתȾѪÇò¼ÆÊýÊÒ±íÃæ

ͼ3 ѪÇò¼ÆÊýÊÒ±íÃæ

ÿ¸öѪÇò¼ÆÊý°åÓÐÉÏÏÂÁ½¸ö¼ÆÊýÊÒ£¨Èçͼ1£©

ÿ¸ö¼ÆÊýÊÒ·ÖΪ¾Å´ó¸ñ£¨Èçͼ3£©

ÆäÖÐ×îÖмäµÄ·½¸ñ·ÖΪ25¸öÖиñ£¬Ã¿¸öÖиñÓÖ±»·ÖΪ16¸öС¸ñ£¬Òò´Ë¼ÆÊýÊÒÖÐÒ»¹²ÓÐ400¸öС¸ñ¡£Ã¿´Î¼ÆÊýʱѡȡͼ3ÖкìÉ«²¿·Ö¼ÆÊý£¬¼ÆÊý½á¹û³ËÒÔ5µÃµ½Ò»¸ö¼ÆÊýÊÒÖÐ×ܵÄϸ°û¸öÊý

Ïà¹Ø·þÎñ

Ïà¹ØÔĶÁ

Á¢¼´Ñ¯¼Û
  • ÐÕÃû

  • µ¥Î»

  • µç»°

  • ×ÉѯÏîÄ¿

  • ÑéÖ¤Âë

  • ÁôÑÔ:



¡¾ÍøÕ¾µØÍ¼¡¿¡¾sitemap¡¿


¡¾ÍøÕ¾µØÍ¼¡¿¡¾sitemap¡¿