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抗独特型抗体

抗体是体液免疫的最主要成分，是免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记忆B细胞增殖分化形成的浆细胞产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白（Immunoglobulin, Ig）分子。作为具有生物学功能的大分子蛋白质，抗体既可以通过其抗原结合部位识别并结合相应的抗原，同时也具有抗原性，可以刺激机体产生相应的抗体。

同种型、同种异型和独特型

由于抗体产生的遗传基础不同，因而不同抗体分子的抗原性存在差异。利用血清学方法可以测定和分析不同抗体分子的抗原性并将其进行分类，称之为抗体的血清型。抗体的血清型可以分为同种型（Isotype）、同种异型（Allotype）和独特型（Idiotype, Id）。

	同种型，指同一种属所有个体抗体分子共有的抗原特异性标志，其表位存在抗体的恒定区。
	同种异型，指同一种属不同个体间抗体分子所具有的不同抗原特异性标志，其表位广泛存在于抗体的恒定区。
	独特型，指每个抗体分子所特有的、存在于可变区的抗原特异性标志。独特位可位于抗体分子V区的互补决定区（CDR）,也可位于抗体分子V区的骨架区（FR）。

什么是抗独特型抗体？

独特型由若干表位组成，称为独特位（idiotope），它可刺激机体产生相应的抗体，即抗独特型抗体（anti-idiotypic antibody, AId）。独特型和抗独特型抗体可以形成复杂的网络，在免疫调节中占有重要地位。

抗独特型抗体的类型

根据抗独特型抗体与独特型反应的特点，可将抗独特型抗体分为Ab2α、Ab2β、Ab2γ、Ab2δ四类。

Ab2α	由位于Id骨架区的独特位诱导产生，与Id的结合不影响与抗原的结合，属于抗原非抑制性的抗独特型抗体。
Ab2β	由位于Id抗原结合位的独特位诱导产生，这类抗独特型抗体在三维结构上与抗原类似，Ab2β和Id的结合可以完全阻断抗原与Id的结合，这类抗独特型抗体在实际应用上具有重要意义。
Ab2γ	由靠近抗原结合位的独特位诱导产生，与Id的结合可以抑制抗原与Id的结合。与Ab2β不同的是，Ab2γ在三维结构上与Id原始抗原的结构并不相似。Ab2γ在与Id结合后，可导致Id可变区三维结构改变，干扰抗原与Id的结合。
Ab2δ	既能识别Id骨架结构上的独特位，同时也能识别抗原上具有交叉反应结构的表位，是一类比较少见的抗体。

根据结合模式的不同，可将抗独特型抗体分为抗原阻断型、抗原非阻断型和药物靶标复合物型。

抗原阻断型

抗原阻断型

互补位特异性
阻断抗原抗体结合

抗原非阻断型

抗原非阻断型

互补位非特异性
不阻断抗原抗体结合

药物靶标复合型

药物靶标复合型

特异性结合药物靶点复合物
不阻断抗原抗体结合

抗独特型抗体的应用

根据免疫网络学说，作为“内影像”的抗独特型抗体在结构和功能上能模拟相应抗原，在一定程度上替代原始抗原，因此可以将抗独特型抗体作为抗原的替代物用于免疫学研究及基础和临床医学研究，而且在传染性疾病的防治机理研究和肿瘤治疗等应用研究中也取得了重大进展。

1.寻找病毒受体

病毒受体指位于宿主细胞表面能够被病毒吸附蛋白识别并与之结合，从而引起病毒感染的分子复合物，大多数属于蛋白质。病毒受体是公认的引发病毒感染宿主细胞的主要决定因素，也是影响病毒宿主特异性和组织亲嗜性的决定因素之一。根据Jerne的免疫网络学说，作为抗原“内影像”的抗独特型抗体在结构和功能上能模拟相应的外来抗原，因此能够用于模拟病毒寻找细胞受体蛋白。通常选择病毒的中和抗体制备抗独特型抗体，所获得的抗独特型抗体能很好地模拟病毒抗原。

2.制备受体拮抗剂

受体拮抗剂指能与受体结合，但不具备内在活性的一类物质，也指与受体有较强的亲和力而无内在活性的药物。例如传统的生长激素受体拮抗剂主要分为两类，生长激素类似物和抗生长激素受体抗体。抗独特型抗体可以代表一种制备拮抗剂的新策略并应用于其他细胞因子和生长因子拮抗剂的研究。

3.疫苗研究

抗独特型抗体Ab2β作为抗原的模拟物，可代替病原体诱导机体产生抗病原体的特异性免疫应答，即所谓抗独特型疫苗。抗独特型疫苗是免疫调节网络学说发展到新阶段的产物，无论抗原是细菌、病毒还是寄生虫，或是蛋白质还是多糖，都可用其“内影像”抗体来诱导机体的特异性免疫应答，从而产生保护性免疫应答。目前，已有许多用抗独特型抗体制备的实验室疫苗接种动物后能使免疫动物抵抗病原体的感染。

除病原防治领域外，抗独特型肿瘤疫苗的研究也逐渐成为研究热点。无论是最初的鼠源性Ab2β，还是Ab2β的Scfv疫苗以及与DC、细胞因子等联合制成的疫苗，抗独特型抗体的功能在不断得到改进和完善，在大多数动物试验研究中都能诱导出抗肿瘤的特异性细胞免疫和体液免疫，在临床试验中也取得了较好的疗效。

4.诊断试剂

抗原是临床免疫诊断中最为关键的试剂之一，但由于某些天然抗原的自然含量极少，或者纯化抗原极其困难，或者抗原本身具有危险性等原因，难以获得必要的天然抗原。用抗独特型抗体替代这些抗原作为诊断试剂，不仅可以克服这些困难，而且具有重复性强、稳定性好、可标准化等优点。

5.自身免疫病研究

自身免疫病是机体产生对自身成份的免疫应答并造成病理损害而引起的一系列疾�。Ｓ胱陨硪慰乖氖头�、自身反应的T细胞克隆激活以及由于具有与自身交叉反应抗原的病原体感染有关。随着免疫网络学说和抗独特型抗体研究的发展，进一步提示了独特型网络维护机体免疫系统自身稳定的一个重要功能，如果调节失常，就可能导致自身免疫病的发生。

6.药代动力学检测

抗体药是生物技术药物的重要组成部分，其药代动力学（PK）检测是生物技术药物开发过程中的重要挑战之一。PK检测通过检测抗体药在动物或人体内的血药浓度-时间曲线、组织分布、代谢转化排泄等，对药物的临床安全性及有效性进行评估，确定药物初始使用剂量，指导临床用药。抗独特型抗体是抗体药PK分析的关键工具试剂，可以用于检测血液中抗体药的含量，包括游离型、结合型及总量。抗原阻断型抗独特型抗体可以检测游离型抗体药，抗原非阻断型抗独特型抗体可以检测抗体药总量，而药物靶标复合型可以检测检测结合型抗体药。

7.免疫原性分析

药物的免疫原性，通常是指其诱发抗药抗体（Anti-drug antibody, ADA）反应的能力。抗体药作为外源性蛋白，不可避免地会激活机体自身地免疫反应，诱导产生抗药抗体，从而影响抗体药的安全性和有效性。抗体药人源化可以减少非人源成分带来的各种风险，但是仍会产生一定的抗药抗体。

免疫原性分析是生物技术药物临床研发中的重要部分，通常是通过对药物引起的抗药抗体的检测和确认来评估药物的免疫原性。有效评估抗体药物的免疫原性，开发可靠的评估检测方法尤为重要。免疫原性筛选通常使用操作方便快捷、能够高通量测定的ELISA方法。其中桥式ELISA法最为常用，该方法是利用包被在酶标板上的抗体药物捕获血清样品中的ADA，然后加入生物素标记的抗体药物，使其与ADA结合。接者用链霉亲和素-辣根过氧化物酶偶联试剂作为检测试剂，加入酶反应底物显色后，再利用酶标仪进行检测。此法的优点是能检测各类抗体的亚型，可高通量检测。在分析患者样本中是否存在抗药抗体时，常使用多克隆抗独特型抗体作为阳性对照。

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